當(dāng)污染來(lái)自儀器內(nèi)部，你的每一步清洗都至關(guān)重要。

通過(guò)前三期的排查，如果已確認(rèn)污染來(lái)自儀器系統(tǒng)內(nèi)部，那么真正的挑戰(zhàn)才開(kāi)始。儀器內(nèi)部的污染更為隱蔽和頑固，需要系統(tǒng)性的深度清洗。本期將直擊核心，帶你逐一攻克色譜柱、流路與檢測(cè)器這三大內(nèi)部污染重災(zāi)區(qū)。

排查總綱：由表及里，循序漸進(jìn)

處理系統(tǒng)內(nèi)部污染，必須遵循科學(xué)的順序，建議遵循以下流程圖所示的路徑，效率高：

第一步：色譜柱污染排查與清洗

色譜柱是污染物容易滯留并緩慢釋放的部位。

污染類型判斷：

殘留污染：前次樣品中強(qiáng)保留組分未完全洗脫。

固定相流失/污染：填料降解或被不可逆吸附的雜質(zhì)污染。

排查與清洗操作：

1.  初步?jīng)_洗判斷：連續(xù)進(jìn)樣5-10針強(qiáng)溶劑（如高比例甲醇），觀察目標(biāo)鬼峰的峰面積是否逐針減小。若減小，則很可能是殘留污染，持續(xù)沖洗可能解決。

2.  強(qiáng)力清洗程序：參考您購(gòu)買的色譜柱使用說(shuō)明中的深度清洗程序進(jìn)行清洗。

3.  終驗(yàn)證：執(zhí)行一次系統(tǒng)空白（空針）測(cè)試。若鬼峰依然存在且未見(jiàn)減弱，則基本可排除色譜柱是唯一污染源，需進(jìn)入下一步排查。

防患于未然：

如何保護(hù)您昂貴的色譜柱？完成上述深度清洗后，如何避免分析柱再次成為污染“重災(zāi)區(qū)”？有效且經(jīng)濟(jì)的方法是：在分析柱前加裝一支保護(hù)柱。它如同色譜系統(tǒng)的“前置過(guò)濾器”，能主動(dòng)截留樣品基質(zhì)和流動(dòng)相中的強(qiáng)保留雜質(zhì)、顆粒物，防止其進(jìn)入并污染核心的分析柱。

依利特保護(hù)柱核心價(jià)值：

將保護(hù)柱納入日常分析流程，是從根本上降低維護(hù)頻率、確保數(shù)據(jù)重現(xiàn)性的明智選擇。

第二步：樞紐地帶——進(jìn)樣閥與流路清洗

進(jìn)樣閥的定量環(huán)、針座、流路切換閥是污染物交叉吸附和滋生的溫床。

關(guān)鍵清洗操作：

1.  手動(dòng)沖洗進(jìn)樣閥：

將進(jìn)樣閥置于“Load”和“Inject”位置，分別使用注射器吸取純甲醇或異丙醇，反復(fù)沖洗樣品環(huán)（Loop）接口和進(jìn)樣針座。

2.  利用儀器在線沖洗功能：

大多數(shù)液相色譜儀的軟件中都有“閥清洗程序”或“針清洗程序”。設(shè)置用強(qiáng)溶劑（如異丙醇）對(duì)進(jìn)樣針和閥內(nèi)部進(jìn)行多次、長(zhǎng)時(shí)間的高強(qiáng)度沖洗。

依利特Kromstation軟件“針清洗”程序界面，點(diǎn)擊注射器排氣即可進(jìn)行進(jìn)樣針和閥的清洗

3.  排查連接管路：

檢查泵到進(jìn)樣閥、進(jìn)樣閥到色譜柱之間的管路。如果長(zhǎng)期使用，更換為新管路，再觀察鬼峰情況。

第三步：檢測(cè)器深度清洗

污染物終在此被檢測(cè)，流通池或離子源本身的污染會(huì)直接產(chǎn)生高背景噪音和鬼峰。

請(qǐng)參考儀器廠家給出的清洗建議方案，謹(jǐn)慎進(jìn)行檢測(cè)器的深度清洗。

重要驗(yàn)證步驟：

完成所有清洗后，更換一根已知絕對(duì)干凈、性能良好的色譜柱進(jìn)行終測(cè)試。如果鬼峰消失，證明原色譜柱是主要污染源；如果鬼峰仍存在，則表明儀器流路或檢測(cè)器仍有頑固污染，可能需要更專業(yè)的維護(hù)。

特別提醒：別把“基線漂移”誤當(dāng)鬼峰

在梯度洗脫中，流動(dòng)相比例變化本身會(huì)引起基線上升或下降，形成類似寬峰的漂移，容易被誤判為鬼峰。

真正鬼峰是尖銳的峰形；而梯度基線漂移是平滑、連續(xù)的變化，且與梯度程序時(shí)間高度相關(guān)。處理方法：    

1.  使用更高純度的溶劑，特別是水相。  

2.  在梯度開(kāi)始時(shí)增加初始比例平衡時(shí)間（如從5分鐘延長(zhǎng)至10-15分鐘）。    

3.  （針對(duì)LCMS）合理設(shè)置溶劑延遲時(shí)間，避免掃描流動(dòng)相初始脈沖帶來(lái)的高背景。